开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究背景
肥胖症（Obesity）是一组常见的代谢症群。当人体进食热量多于消耗热量时，多余热量以脂肪形式储存于体内，其量超过正常生理需要量，且达一定值时遂演变为肥胖症，其主要由遗传因素、神经精神因素、内分泌因素、棕色脂肪组织异常、环境因素等所致。肥胖症患者并发其他疾病的几率明显高于非肥胖症者，常见的有心血管疾病如高血压、冠心病；肺功能异常如肥胖性低通气综合征、睡眠窒息；肌肉骨骼病变如关节炎、痛风、骨质疏松等。肥胖给人们工作生活带来诸多不便，已成为威胁健康的重要“杀手”之一，且是世界范围内导致人类死亡的第五大因素。
近年来对肥胖症患者的研究发现，白色脂肪组织(White adipose tissue，WAT) 与棕色脂肪组织(Brown adipose tissue，BAT)或米色脂肪组织(Beige adipose tissue，Beige)的比例在脂肪发育的调节中非常重要。BAT或 Beige的数量越多，全身能量的消耗增加，人体体重指数越低，因而机体体重减轻。因此，使白色脂肪组织向棕色转化可能是肥胖症治疗的新思路。
VEGF-B是血管内皮生长因子（VEGFs）家族中较晚发现的因子，通过旁分泌的方式与其受体血管内皮细胞生长因子受体-1（VEGFR-1）及神经黏毛蛋白-1(Neuropilin-1，NRP-1)引起一系列反应。VEGF-B主要表达在能量代谢旺盛的组织，包括心脏、骨骼肌、棕色脂肪组织（BAT）。据报道，研究发现，VEGF-B 通过其受体 VEGFR-1 和NRP-1调节脂肪酸转运蛋白( Fatty acid transport proteins，FATPs),控制脂肪酸的内皮摄取。VEGF-B 敲除小鼠显示出心脏、肌肉和BAT中脂质累积减少和WAT中脂质累积增加的表型，证明VEGF-B参与棕色样脂肪分化的调节。
鉴于VEGF-B 在调节脂肪分化和代谢平衡中发挥重要作用，研究VEGF-B促进脂肪细胞分化的具体机制可能有助于确定新的药物靶标和临床治疗方案。
二、研究目的及意义
前期研究发现VEGF-B在小鼠体内可以诱导白色脂肪棕色化，本课题旨在探究VEGF-B在体外能否促进棕色脂肪细胞分化或促进白色脂肪细胞转分化为棕色脂肪细胞，为阐明VEGF-B的代谢调控活性提供理论依据。
- 实验方案
- 3T3-L1细胞的体外诱导分化
实验采用小鼠3T3-L1前脂肪细胞，设置对照组和诱导分化组。待细胞生长达到接触抑制两天后，向诱导分化组中加入诱导分化培养基A，培养4天后更换为诱导分化培养基B，再培养2天后更换为基础培养基，直至细胞完全成熟分化，期间每2天换液一次；而对照组始终保持使用基础培养基。诱导分化程序结束后，移去培养基，用4%多聚甲醛固定细胞30min，加入油红O染色液避光浸染20min；用PBS缓冲液冲洗背景至透明后，在显微镜下使用白光观察3T3-L1细胞的分化情况。
四、研究难点
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