开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
高产蛋白酶菌株的筛选、初步鉴定及发酵优化
15404322 马海燕
实验目的
从不同土壤中筛选获得多株产蛋白酶的菌株,测定其蛋白酶活由通过比较这几株菌的菌落直径、水解圈比值以及发酵液的酶活力,筛选出一株高产蛋白酶菌株;采用单因素优化法选择最优碳源、氮源,最适温度和pH;通过观察菌株的形态特征以及根据《伯杰氏细菌手册》用相应的试剂对菌株进行初步鉴定,大致判断高产菌株的类型。
二、实验材料与方法
1、实验材料:
土壤样品
2、试剂:
酪蛋白;Folin-酚;蛋白胨;酵母提取物;2000bp DNA Marker。
- 培养基:
菌种筛选固体培养基:蛋白胨10 g,牛肉膏3 g,氯化钠5 g,琼脂17 g,蒸馏水1000 ml,pH7.2,高压蒸汽灭菌;脱脂奶粉75 g(0.75%),105 ℃灭菌15 min;
种子培养基:酵母提取物0.5% ,蛋白胨1.0% ,葡萄糖2%,氯化钠0.5%,磷酸氢二钾0.7%,磷酸二氢钾0.3%;
菌种发酵液体培养基:同上;
液体培养基灭菌:高压蒸汽灭菌(121 ℃, 20 min)。
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