开题报告内容：
- 研究意义
中国是目前老年人口数量最多的国家，约占世界老年人口五分之一。根据世界卫生组织对老年人的划分标准，当前60岁以上的老年人口已达1亿4千多万，占全国总人口的l1%左右。自1999年以来中国进入老龄社会开始，老年人口数量就不断增加。据估算2100年前后我国老年人口将高达3．18亿，占总人口的31％。老龄化程度，高龄程度以及相应的各种社会问题将会越来越突出的表现出来。衰老是一个渐进性，累积性，遍性和随着年龄的增长，生理性衰老和病理性衰老逐步出现，各种老年期易发疾病将会对老年人健康构成极大的威胁。
据世界心脏联盟统计，老年人涉及心血管疾病的有冠心病占19．6％，接近五分之一，高血压12．9％，心率失常7．0％，脑供血不足5.6％，3项疾病累计占到45．1％。心血管疾病危害巨大，据世界卫生组织统计，全球每年约1700万人死于心血管疾病，也就是说每三个死亡的人中就有一人死于心血管疾病。这一数字到2020年预计会增加50％，而且死亡人数的
80％分布在低中等收入国家。故该类疾病被公认为世界“头号杀手”。根据国家疾病检测系统的报告资料显示，同样在我国心血管疾病位居死亡率首位，是现代社会中老年人口健康的最大威胁。
水蛭最早记载于《神农本草经》，称其“主逐恶血，瘀血”。水蛭作为中药一直被广泛使用，到现在已经有3000多年的历史。通过很多学者的研究，发现水蛭不仅有抗凝血酶的作用，还有抗血栓、降血脂及抗炎等多种功效，因此水蛭在临床上便有了非常广泛的应用，不仅可治疗多种心血管疾病，对前列腺炎、癌症、静脉曲张、等疑难杂症都有一定的疗效，水蛭作为新药开发成为了热点。
中药水蛭为水蛭科水蛭，蚂蟥和柳叶蚂蟥3种动物的干燥体，是活血化瘀的常用中药，广泛用于多种心脑血管疾病。其中，蚂蟥即宽体金线蛭为我国临床主要应用品种。蚂蟥呈扁平纺锤形，有多数环节，长4～10cm，宽0.5～2cm。背部黑褐色或黑棕色，稍隆起，用水浸后，可见黑色斑点排成5条纵纹；腹面平坦，棕黄色。两侧棕黄色，前端略尖，后端钝圆，两端各具1吸盘，前吸盘不显著，后吸盘较大。质脆，易折断，断面胶质状，气微腥。
随着现代医学的发展，人们对水蛭的研究有了更进一步的发展，对水蛭的药效的也有了新的认识。多位学者开始对水蛭的水溶性提取物进行研究，发现其具有抗凝血酶的的活性。经研究表明这种具有特殊活性的物质存在于水蛭的唾液腺中，科学家们将其命名为水蛭素。从此，人们便开始对水蛭素的组成，结构等性质进行研究，通过进一步发展各种分离纯化的手段和技术，科学家们得到了比较纯的水蛭素，并且证实了水蛭素是一种多肽蛋白，研究表明水蛭素是一种凝血酶抑制剂，它能与血液中凝血酶结合，使凝血酶失去活性，从而阻止血液凝固，而水蛭的多种药用效果都与其抗凝血酶活性的特性密切相关，所以全世界便开始对水蛭开展了更深入的研究。
水蛭中的多肽蛋白除了水蛭素以外，人们又陆陆续续发现了其它很多具有活性的多肽蛋白，[13]例如伊格啉，能够抑制胰蛋白酶、粒细胞弹性蛋白酶和组织蛋白酶G；LDTI，抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶；Hirustasin，抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织蛋白酶G、组织型释放激肽酶；Bdellastasin,抑制胰蛋白酶和纤溶酶；Calin,抑制胶原蛋白诱导的血小板附着和聚集；Staratin,抑制血管性血友病因子依赖的血小板与胶原蛋白的结合；失稳酶，溶解血栓； Piguamerin,抑制胰蛋白酶和血浆及组织激肽释放酶；Therostasin,抑制凝血因子Xa；Antistasin,抑制凝血因子Xa；Bufrudin,抑制凝血酶；Hementin，降解纤维蛋白原和纤维蛋白；Haemadin,抑制凝血酶；Nephelin,抑制粒细胞弹性蛋白酶；Eli,抑制胰凝乳蛋白酶、粒细胞弹性蛋白酶、组织蛋白酶G；Whitmanin，抗凝血；Theromin,抑制凝血酶；这些多肽蛋白都具有非常重要的药理活性。
近些年来，随着科学技术的进步，人们对水蛭也有了更进一步的了解，水蛭的药理作用也备受人们的关注，在传统中药的应用中，是以水蛭干体整体煎服以达到相应的效果，然而其中的具体起作用的有效成分我们仍然不完全清楚，尽管国外的学者已经陆续从活体水蛭中分离出了包括水蛭素在内的大量活性成分，然而对于炮制后的干体水蛭的研究还极为欠缺，特别是抗凝物质的序列至今少有报道，因此我们需要继续对水蛭的研究，所以本次实验的目的就是从水蛭中分离纯化出有抗凝血因子活性的小分子多肽物质，我们通过广泛的文献调研制定了水提法、阴离子交换层析、膜分离和制备型高效液相色谱法相结合的实验方案，并使用比浊法进行抑制凝血因子活性研究，最终得到有抗凝血因子活性的小分子多肽。旨在通过对其进行研究的基础上，为新药的开发奠定基础，为中药水蛭中抗凝血因子活性物质的研究积累经验。
据权威调查，3种来源药材中，目前国内药材市场上销售流通的水蛭药品只有宽体金线蛭，所以绝大多数地区临床上可使用的水蛭主要为非吸血类且不含水蛭素的宽体金线蛭。所以我们选择宽体金线蛭作为研究对象，围绕其抗凝血活性物质展开研究。
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