开题报告内容：
Ⅰ.课题背景
胰岛再生源蛋白（regenerating islet-derived protein, Reg）又称为胰石蛋白或胰腺相关蛋白，属于Ca依赖的植物血凝素超家族，可在人体多种组织中表达。大量研究表明Reg蛋白在组织损伤修复、治疗胰腺炎、抗肿瘤以及神经系统损伤修复中发挥重要作用。Reg蛋白家族包含多个成员，根据其基因编码蛋白的一级结构可分为I、II、III、IV四种亚型。其中II型蛋白仅存在于小鼠体内，而I型、II型、IV型蛋白在人、小鼠及大鼠体内均有发现，且I型蛋白有alpha;、beta;两种，III型蛋白有alpha;、beta;、gamma;、delta; 四种。
研究表明RegⅢ蛋白在胰腺损伤修复及治疗胰腺炎中有显著作用。本课题将以RegIIIalpha;为主要研究对象在已构建pET28a-Reg3alpha; T7 E.coli原核表达菌后对其进行表达纯化与活性测定。为后期RegIIIalpha;功能验证奠定基础。
Ⅱ.实验思路
RegIIIalpha;原核表达载体构建成功后，对菌种进行不同条件培养并进行菌液SDS-PAGE电泳检验，摸索合适的表达条件，实现RegIIIalpha;蛋白包涵体在大肠杆菌中的过量表达。并通过细菌裂解、亲和层析纯化以及透析复性等手段获得有活性的RegIIIalpha;蛋白，对该蛋白产物进行活性检测。
可能涉及的研究手段：聚合酶链反应、琼脂糖凝胶电泳技术、质粒的提取、感受态细胞的制备、菌株转化及鉴定、菌种的扩大培养、包涵体蛋白的提取、SDS-PAGE技术、分子筛技术、凝胶层析技术、镍离子亲和层析色谱、梯度透析复性技术等。
Ⅲ.实验方案
1.重组RegIIIalpha;包涵体的表达与提取
工程菌构建完成后，经过扩大培养和IPTG诱导表达重组蛋白。通过裂解细胞和离心方法提取目的蛋白包涵体。实验中为了进一步除去包涵体中混有的菌体碎片以及杂蛋白，可通过用不同浓度尿素溶液对包涵体洗涤的方法，最大程度的避免杂蛋白引入亲和层析。确定最佳实验条件后将蛋白样品溶解继而进行后续实验。
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
