转基因动物鉴定的研究进展
摘要:转基因技术是通过人工操作的方式,将外源基因导入动物胚胎细胞,使之整合到动物的基因组内,使该转基因动物能稳定地将此基因遗传给后代的实验技术。转基因动物的鉴定, 则是对在此之前所进行的工作进行检验的关键。转基因小鼠是最早建立的转基因动物。此项技术是近年来生命科学中最热门,发展最快的领域之一,已经成为现代生物学家不可缺少的研究工具。它可以通过对基因的操作,直接观察基因在活体内的活动情况及其表达产物所引起的表型效应。其既具有深远的理论价值,又有重大的应用价值。目前除转基因小鼠外,转基因兔、转基因绵羊、转基因牛等陆续产生。
关键词:转基因动物 鉴定 外源基因 遗传
1.转基因动物的研究意义
转基因动物技术是将外源基因通过载体人工地导入受体动物体内,让其获得新特征或功能的一门技术。利用转基因技术可以改变动物性状,培育出新品种,利用其生产出人所需的生物制品,应用于食品医药等方面。世界各国相继开展技术研究,并先后在兔、羊、猪、牛、鸡、鱼等动物中实验成功。在农业领域上,可以改良动物的生产性能,提高动物的抗病能力。 在医药领域上,能建立诊断和治疗人类疾病的动物模型,生产医用蛋白和可用于人体器官移植的动物器官。总而言之,转基因技术是现代生物技术的核心,运用转基因技术培育高产、优质、多抗、高效的新品种,推进转基因技术研究与应用,是着眼于未来国际竞争和产业分工的重大发展战略,是提高农业国际竞争力的重要途径。经过多年努力,我国在重要基因发掘、转基因新品种培育及产业化应用等方面都取得了重大成果。当前我们必须认真实施好国家转基因生物新品种培育重大专项,努力抢占未来经济科技竞争制高点,加速转基因生物技术研究与应用健康发展,为我国农业可持续发展提供强有力的科技支撑。
2.转基因小鼠制作方法-条件性基因剔除
Cre/loxp系统由Cre 重组酶和识别序列loxp 位点组成。Cre重组酶来自侵染大肠杆菌P1噬菌体。不管在大肠杆菌体内或者体外,可以启动DNA分子内部或分子与分子之间的重组与联合,重组发生在loxp的特定位点,并且不需要其他的蛋白质。在Cre重组酶存在时,两个loxp位点可发生同源重组,切除中间区域,剩下一个loxp位点。 通过在靶序列引入标记基因和两侧的loxp位点,以Cre 酶介导位点特异性重组。Cre 酶介导的遗传重组可进行定点、定时、定组织的特异性控制5。Cre/loxp 体系介导的基因缺失可以切除loxp 位点之间的全部序列,外部序列全被保留,达到以两个重组位点之间或之外不同序列设计获得不同的定点修饰靶基因的目的。表达Cre的胚细胞中几乎所有loxp之间序列均被切除,效率十分可观,并可在很大的浮动范围内准确预测缺失长度。Cre/ loxp 系统介导的基因重组是一种可逆的过程,重组程度与Cre 重组酶的表达水平有关。Cre特异识别loxp 位点是一种典型的回文序列结构。每个loxp 位点,由两端各13bp 的反向重复序列与位于其中间的8bp 非对称间隔区组成。8bp的间隔区为同源重组链交换发生区域6。Cre所介导的loxp位点的重组是研究基因功能的革命性的武器。这项技术最有利的应用就是可以条件性的剔除或激活基因的功能。对于前者Cre所介导的重组可以精确地剔除基因内的必要区域,以至于不能表达有功能的产物;对于后者,Cre所介导的重组可以去除表达有功能的产物的阻遏物,而激活基因的表达。
3.转基因动物的鉴定
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