通过VIGS技术对苦蘵药效成分合成途径的解析的文献综述
摘要: 本研究在前期成功构建了酸浆属药食两用植物上的基因研究技术平台,利用植物病毒介导的特异基因的过表达和基因沉默技术,来揭示其药效成分的合成代谢途径,本研究将利用2种植物病毒,马铃薯X病毒属的潜病毒狗尾草花叶病毒(FoMV)来实现候选基因的过表达、通过烟草脆裂病毒(TRV)实现候选基因的基因沉默(VIGS),是本研究的成功的重要研究素材和基础。利用候选靶基因的过表达和VIGS技术,对不同基因在过表达和干涉情况下的次生代谢物的差异表达进行检测和分析,鉴定药效成分合成代谢中的主效基因。
关键词:苦蘵; 病毒诱导的基因沉默; FoMV;TRV;PCR
一、文献综述
1 苦蘵的药用价值
苦蘵是茄科酸浆属一年生草本植物[1],苦蘵的宿萼、带宿萼的果实、根及全草均可入药,夏、秋采集,鲜用或干用,具有清热、利尿、解毒之功,用于治疗感冒、肺热咳嗽、咽喉肿痛、龈肿、湿热黄疸、痢疾、水肿、热淋、天疱疮、疔疮等症[2]。现代药理学研究表明其具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎、抗菌、抗氧化等活性[3]。
一般从酸浆属植物中分离获得,也是酸浆属植物的主要成分--酸浆苦素类化合物,酸浆苦素类化合物是天然存在的裂环甾体,酸浆苦素B、D、F、G有抗炎和免疫调节作用[4],体内的抗炎活性很可能是通过活化糖皮质激素受体发挥作用的,由这些天然裂环甾体衍生的化合物对炎症性疾病是一种新的治疗手段[5]。
近年来,从中草药中提取的抗肿瘤有效成分日益得到人们的重视,由于这类药物具有疗效突出、不良反应小等特点,在治疗肿瘤的药物使用中,植物来源药物占了越来越高的比例[6-7]。我国的药用植物种质资源丰富,如果能将中药中抗肿瘤有效成分筛选分离出来,明确其抗肿瘤作用及机理,对于抗肿瘤药物的研制开发以及肿瘤治疗具有重要的意义。苦旘的提取物常作为中草药用于肝癌、肺癌和子宫癌的治疗[8-9]。其粗提物能够抑制人类乳腺癌细胞细胞的增殖,阻滞G2/M并诱导细胞凋亡[10]。
2 病毒诱导的基因沉默(VIGS)
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