一、课题的研究背景、意义和目的
随着分子生物学和细胞生物学的发展，单克隆抗体( monoclonal antibody，Mc Ab) 迅速广泛地应用于各个领域。所谓 Mc Ab 是利用 HAT 培养基筛选出既能稳定生长又能产生抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞分泌的抗体是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的具有高度特异性和均一性的抗体，故称之为 Mc Ab。单克隆抗体经历了鼠源性、人源性和全人化抗体三个阶段。现对单克隆抗体的制备技术，及其在临床医学和疾病的诊断与治疗等领域的广阔应用前景进行综述。Mc Ab 的研究现状鼠源性单抗 目前所生产的单抗大多数是鼠源性的。其在临床应用方面还存在着很大的弊端，一方面，鼠源单抗与自然杀伤细胞等免疫细胞表面 Fc 段受体亲和力弱，产生的抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用较弱，对肿瘤细胞的杀伤能力较弱，人血循环中的半衰期短，它发挥细胞毒作用作用的时间较短; 另一方面，鼠 Mc Ab 还具有免疫原性，产生人抗鼠抗体，既降低单抗的治疗效果，又诱发变态反应。
二、课题研究的主要内容
1建立检测方法：客户提供抗原和亲本鼠源抗体，建立检测抗体结合活性方法。
2获得抗体基因：客户提供亲本鼠源抗体基因序列。弘业新创公司也提供从杂交瘤细胞中克隆抗体基因的服务。
3设计人源化方案：分析抗体序列和模拟抗体结构，定制人源化方案。
4构建人源化抗体库：构建人源化IgG抗体基因库，转染CHO细胞或293细胞，构建细胞表面展示抗体库。
5筛选人源化抗体：采用ELISA和FACS方法，筛选人源化抗体。
6测定亲和力常数：根据客户要求，采用不同方法测定抗体亲和力常数。
7小量蛋白制备：采用高效瞬时表达系统或稳定表达系统，表达1 mg-1 g人源化抗体，供客户检测抗体的体内和体外活性，评估开发抗体药物的前景。
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