文献综述
1.1研究背景和意义
随着我国经济的快速发展,人们追求效益最大化,抗生素的使用越来越普遍,如用抗生素治疗奶牛的乳腺炎;畜禽养殖户在饲料中添加抗生素和激素,提高种畜的抗病能力和食欲;水产养殖用户为了让大闸蟹加快脱壳过程、长得肥大生猛,给蟹喂食大量抗生素和激素等。我国是抗生素生产和使用大国,据统计每年约有6000吨抗生素用于饲料添加剂,占全球抗生素饲料添加剂的50%。
抗生素的大量滥用已经严重威胁到人们的身体健康,特别是氯霉素的滥用,氯霉素残留的潜在危害是对骨髓造血机能有抑制作用,可引起人的粒细胞缺乏病、再生障碍性贫血和溶血性贫血,对人可产生致死效应。而且,氯霉素能导致严重的再生障碍性贫血,其发生与使用剂量和使用频率无关。人体对氯霉素较动物更敏感,婴幼儿的代谢和排泄机能尚不完善,对氯霉素最敏感,可出现致命的“灰婴综合征”。
随着农药和抗生素等药物残留问题进入人们的视野。在食品安全这个全球关注的热点问题上,如何快速、准确地检测食品安全的问题已成为重中之重。要检测抗生素在食品中的残留,必须选择特异性强、灵敏度高、高效快速的检测方法。因此,研究各种抗生素类残留检测的方法,提高其灵敏度与选择性具有十分重要的意义。
1.2国内外现有的抗生素检测方法
现有的检测方法主要分为三类:理化检测技术、微生物检测技术和免疫检测技术。
1.2.1理化检测技术
理化检测技术包括高效液相色谱法、气相色谱法、质谱法以及联用波谱和色谱的联用技术等,其原理是利用抗生素分子中的基团所具有的特殊反应或是特殊性质来测定其含量。其中,以高效液相色谱法和联用技术最为常用。
高效液相色谱法:该法的过程引入气相色谱理论,技术上采用了高压泵,高效固定相和高度灵敏度检检测装置,检测步骤一般为:样品处理、残留药物分离和残留药物的检测。样品的提取一般使用水和酸化有机溶剂,两者可以同时达到脱蛋白和萃取残留的目的,这种方法对食品中青霉素的提取效果非常好。在得到的水提取液或有机提取液中,由于含有许多其它的共萃取物,所以目标检测物的浓度不高,所以为了降低干扰,提高灵敏度,需要利用离子交换,固相萃取和免疫亲合色谱法来进行净化和浓缩,最后收集浓缩物,再进行液相色谱测定。此方法样品前处理简单、回收率高、实用性强、检验灵敏度高、重现性好、检测数据准确可靠。
联用技术:各种分析技术联用是现代分析的一种趋势,它可以同时进行定性,定量,分离分析。色谱质谱联用检测法就实现了高效层析分离和检测联机,并且由于控制性好、特异性较强、灵敏度较高和重复性均好,所以在对食品中的青霉素类抗生素的分析检测上获得了广泛的使用。
1.2.2微生物检测技术
微生物检测法是应用较为广泛的方法,测定原理是根据抗生素对微生物的生理机能产生的抑制作用,来对抗生素进行定性、定量确定样品中抗微生物药物残留。包括有:TTC法、纸片法和试纸法。纸片法和试纸法这两种方法都属于传统的微生物检测方法,具有时间长、显色状态不明显、操作复杂等缺点。因此,我国现在检测动物源性食品尤其是牛奶中抗生素残留的标准方法是TTC法。
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