摘要:本文概述了灵芝孢子(GanodermaLucidumspore)中灵芝多糖的含量测定方法的科研进程以及一些最新的研究进展。列举了包括蒽酮-硫酸法、苯酚-硫酸法、高效液相色谱法等常用多糖含量测定方法的研究进展。通过总结分析各种方法优、缺点,对课题的后续研究进行展望。
关键词:灵芝孢子,多糖,HPLC法,紫外分光光度法
灵芝收载于《中国药典》2010版一部[1],在中国已有千年的药用历史,俗称仙草。《神农本草经》中记载有治胸中结,益心气,补中,增智慧,不忘,久食轻身不老,延年神仙的功效。灵芝在其子实体发育成熟后,不断从菌管中弹射出孢子,可集成孢子粉。灵芝孢子粉集灵芝之精华,药用价值远高于灵芝子实体和菌丝体[2]。灵芝多糖含量是比较、评价以多糖为有效成分的、以灵芝和灵芝孢子为主体的药材和药品质量的重要指标,因此多糖含量测定方法的研究具有重要意义。
一.灵芝孢子中多糖的研究
灵芝及灵芝孢子化学成分复杂,目前已知的有糖类(还原糖和多糖)、氨基酸、蛋白质、多肽、甾类、三萜类、挥发油、香豆精苷、生物碱、树脂、油脂、多种酶类、微量元素等[3]。灵芝多糖主要分布于灵芝孢子中,毛泉明等[4]曾通过实验测得,灵芝孢子粉的总多糖是栽培灵芝总多糖1.79倍。
灵芝和灵芝孢子均具有抗肿瘤作用、降血糖作用、提高人体免疫力,增强机体的抗病能力、保肝作用、促进新陈代谢,延缓衰老、清除自由基与抗氧化作用、抗菌消炎、解热镇痛、降低转氨酶,降胆固醇、镇静作用等药理作用[5-8]。其中灵芝孢子粉在抑制肿瘤、增强免疫力方面远远超过灵芝子实体,疗效相当于灵芝子实体的75倍[9]。
二.多糖提取与测定方法的研究
1灵芝多糖的提取
灵芝多糖的提取方法主要是传统的水提醇沉法,还有膜分离法、酶解法、超声提取方法、微波提取方法等[4]。翟旭峰等[10]采取响应面分析法对超声波提取灵芝多糖的工艺条件优化得:超声功率320W,提取温度为70℃,提取时间为34min为最优的工艺条件时,多糖得率最高。孟凡冰等[11]考察水料比、超声温度、微波时间对灵芝孢子多糖提取率的影响,确定灵芝孢子多糖提取技术的最佳工艺条件为水料比20∶1,超声提取时间为55min,微波(200W,60℃)提取时间20min,在此条件下测得多糖的提取率为2.23%。在后续实验过程中可根据样品的不同自行探索工艺条件。
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