课题来源：自拟课题
课题依据：血管生成是很多疾病发生发展过程中的重要组成部分，如肿瘤与慢性炎症性疾病，包括慢性风湿性关节炎、银屑病及肉芽肿等。新生血管生成过程受到血管生成促进因素和抑制因素的共同调节，在众多的促进因素中，除细胞因子如VEGF以及低氧微环境之外，炎症环境中炎症细胞分泌的炎症因子对血管生成的促进作用也极其重大。炎症和血管生成具有协同依赖性，炎症细胞能释放各种炎症因子，导致血管内皮细胞活化，活化的内皮细胞一方面通过释放各种细胞因子募集炎症细胞，另一方面形成新生血管，为炎症组织提供氧气和营养物质促进炎症组织的增生。抑制血管生成有利于肿瘤或慢性炎症性疾病的治疗。在复杂的炎症环境中，单核巨噬细胞扮演着不容忽视的重要角色。在本研究中，我们将用人单核巨噬细胞（THP-1）的培养上清模拟炎症环境，以人脐静脉内皮细胞（HUVEC）为研究对象，通过细胞培养、免疫印迹、transwell实验、小管形成实验、大鼠动脉环实验、鸡胚尿囊膜实验探讨药物黄芩素对THP-1诱导的血管生成的抑制作用。
主要解决的问题：
1.黄芩素对THP-1诱导的HUVEC迁移能力的抑制作用
Transwell迁移实验[1,2]
用LPS（1mu;g/ml）刺激THP-1，12h后，换1%胎牛血清培养基1640继续培养12h，离心收集培养上清备用。在6孔板内接种HUVEC培养，当细胞密度大约为90%时，给药物黄芩素处理，浓度分别为0、1、4、16mu;M，4小时后，分别消化收集HUVEC，无血清1640培养基重悬计数，将细胞密度调至2.5105个/mL，在transwell小室的上室接种HUVEC（加入400mu;l细胞悬液），下室分别加入1%胎牛血清培养基1640及THP-1培养上清600mu;l。5%CO2，37C下培养4h后，取出transwell小室，用棉签擦去聚碳酸酯膜靠近内室那一面的细胞，另一面的细胞用甲醇室温固定2min，清洗干净后，用苏木精染色4～5min，清水洗净后用伊红染色10s，洗净后在显微镜下观察细胞，拍照计数分析。
2.黄芩素对THP-1诱导HUVEC形成小管的抑制作用
小管形成实验[3]
用黄芩素（0、1、4、16mu;M）对HUVEC进行预处理。4小时后，将matrigel与等体积的无血清培养基1640混合后点入96孔板中，90mu;L/孔，37C凝固聚合至少30min。消化并收集HUVEC细胞，用1%胎牛血清培养基或THP-1培养上清重悬，计数1.5105个/ml。分别加入已铺好的matrigel上，每孔100mu;l；另设置空白对照组。5%CO2，37C下培养8h后，显微镜下观察并拍照计数分析。
3.黄芩素对THP-1诱导的内皮细胞形成毛细血管样结构的抑制作用
以上是毕业论文文献综述，课题毕业论文、任务书、外文翻译、程序设计、图纸设计等资料可联系客服协助查找。
