题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
拟研究的问题:前列腺癌是男性生殖系最常见的恶性肿瘤之一,在我国的发病率呈现逐年升高的趋势。前列腺酸性磷酸酶(PSA)是目前前列腺癌早期筛查与诊断的重要肿瘤标志物,但PSA是前列腺特异性抗原,而非前列腺癌特异性抗原,其检测结果假阳性率较高,而PSA正常者也不能完全排除前列腺癌。因此,寻找一种特异性好的前列腺癌标志物,并发展灵敏度高、选择性好、快速便捷的检测方法,成为临床医师的迫切需求。2009年,Sreekumar A等[1]通过代谢组学研究发现肌氨酸(sarcosine)参与了前列腺的癌变过程,是细胞癌变的元凶之一,随后发现肌氨酸的诊断准确性优于PSA,但目前肌氨酸的检测过程较为复杂,需要用到大型检测仪器,预处理过程复杂,检测周期长,不便于推广。基于纳米金的比色检测法能有效避免上述缺点,无需大型仪器设备,并能实现高灵敏、简单、快速、裸眼可视检测。本课题拟以尿液中肌氨酸为前列腺癌的标志物,利用纳米金比色法实现高灵敏裸眼检测,为前列腺癌的早期诊断提供理论基础与实验依据。
采用的研究手段:
1.利用柠檬酸钠还原法制备纳米金胶体溶液。
2.将单链寡聚核苷酸结合到纳米金颗粒表面对纳米金颗粒起保护作用。
3.采集含有肌氨酸的尿液与不含有肌氨酸的对照尿液分别加入肌氨酸,利用反应:
肌氨酸 O2 H2O 肌氨酸氧化酶 氨基乙酸 HCHO H2O2,H2O2在Fe2 催化下产生自由基从而切断寡聚核苷酸链而使金纳米粒子处于无保护的状态,体系中存在的高浓度NaCl盐使纳米金发生聚集。从而发生视觉上的颜色变化来判别尿液中有无肌氨酸。
4.设置一组浓度梯度的肌氨酸NaCl溶液,按照流程测定纳米金对不同浓度的肌氨酸的检测限。
5.测试该体系对肌氨酸检测的选择性。
6.处理数据,绘制表格。
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