开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1. 拟研究或解决的问题
葛根汤出自《伤寒论》,由葛根、麻黄、桂枝、白芍、甘草、生姜和大枣等7味药组成,是治疗外感病的代表方之一,原用于项背强、无汗、恶风、脉浮的太阳病。临床实践中运用葛根汤辩证治疗原发性痛经获得了满意的疗效,并已获得专利授权。葛根汤化学成分复杂,在前期研究中对葛根汤灌胃给予大鼠后入血成分进行了初步定性分析,得出葛根入血后的主要化学成分为葛根素和大豆甙元等化合物。目前,关于葛根素与大豆苷等异黄酮的活性研究较多,葛根素具有雌激素样作用、且具有抗氧化、减轻抗脑缺血等活性。因此,研究葛根汤中葛根素在体内的动力学行为,有助于阐明葛根汤的药效物质基础。
2. 采用的研究手段
2.1大鼠灌胃给药
大鼠给药前禁食12h,自由饮水。大鼠灌胃给予葛根汤水提物(2g/ml)10g/kg (相当于临床剂量),于给药前及给药后0min、30min、45min、1h、2h、4h、10h、14h、18h、21h、24h, 从大鼠眼底静脉丛毛细管采血,置肝素钠中抗凝,3500r/min离心10min,分取血浆。
2.2血浆样品预处理
加入有机溶剂沉淀蛋白为常用方法,多加入甲醇、乙腈、高氯酸、三氯乙酸等,此外还有液液萃取法、SPE固相小柱萃取法等。
对血清样品分别采用乙腈沉淀蛋白法、甲醇沉淀蛋白法、乙酸乙酯萃取法和SPE固相小柱萃取法进行预处理,比较这4种预处理方法,从中选择处理过程比较简单、易于操作、去除含药血清内源性物质能力强且对样品的干扰程度较小的处理方法作为本实验的血浆样品预处理方法。
2.3 采用的检测方法
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