多表位疫苗LHUC对幽门螺旋杆菌模型小鼠的预防和治疗作用文献综述

 2023-02-10 00:46:16

一、选题背景幽门螺旋杆菌（H.p）已被确认与慢性胃炎，消化道溃疡，胃黏膜相关淋巴样组织淋巴瘤和胃癌密切相关，目前多重抗生素联合治疗仍是抗幽门螺旋杆菌感染的主要方法，但是由于细菌抗药性的出现，以及长期不合理应用抗生素可引起不良反应，因此近年来提出了包括疫苗疗法在内的多种抗感幽门螺旋杆菌治疗的新方法，相关疫苗的研制与预防及控制其感染意义重大，其中就包括了幽门螺旋杆菌表位疫苗的研究。

表位疫苗是以基因工程或人工合成得到的抗原表位作为触发免疫机制为原理一种新型疫苗，较传统疫苗具有高效，高特异性等优势。

H.p基因组的测序，注释以及生物信息学方法的应用，促进了表位疫苗发展。

幽门螺旋杆菌尿素酶B亚基、过氧化氢酶和黏附素亚基已经被定为一种理想型的抗原。

本文选取三个T细胞表位和四个B细胞表位结合黏膜佐剂不耐热肠毒素构建一种多亚基串联表位疫苗，将其命名为LHUC。

二、研究目的本研究拟通过对幽门螺旋杆菌多表位疫苗的设计，包括幽门螺旋杆菌多表位疫苗融合蛋白抗原的构建，表达，纯化；幽门螺旋杆菌多表位疫苗融合蛋白抗原特性及各表位功能的分析。

考察幽门螺旋杆菌多表位疫苗免疫治疗H.p感染小鼠的效果评价和机制探讨。

三、实验内容1.将幽门螺旋杆菌尿素酶B亚基(UreB)、过氧化氢酶（KatA）、黏附素（HpaA）、疫苗LHUC和黏膜佐剂LTB基因序列构建在大肠杆菌表达载体pET27表达载体中，并将其转入大肠杆菌工程菌BL21中并以包涵体的形式进行表达。

2.将疫苗LHUC和佐剂LTB依次进行Western blot和GM1-ELISA实验验证其免疫原性和佐剂功能。

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