DDX39A可变剪接报告载体的构建文献综述

 2023-03-29 15:28:21

可变剪接报告工具载体minigene的构建

摘要：肝细胞癌(HCC)由于其具有的侵袭性和治疗选择的有限，已经成为全球最致命的恶性肿瘤之一。越来越多的研究证明可变剪接在肝癌发生中起了重要的作用。本综述主要阐述了可变剪接的概念，类型，机制，意义等内容，同时介绍了国内外对于可变剪接研究的现状，以为后续构建DDX39A minigene基因的实验奠定理论基础。

关键词：可变剪接； minigene；DDX39A基因

一、文献综述

1.1 可变剪接的概述

可变剪接又称选择性剪接，指的是在mRNA前体到成熟mRNA的过程当中，不同的剪接方式使得同一个基因可以产生多个不同的成熟mRNA, 最终产生不同的蛋白质，从而产生不同的生物功能。[1]前体m-RNA（pre-mRNA）的选择性剪接通常用于增加正常多细胞生物中基因组表达的mRNA的多样性，选择性剪接的失调则会引起基因表达量异常、蛋白质功能改变，是许多人类疾病（包括癌症）的基础。[2]

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5rsquo;端帽子结构（m7G）和3rsquo;端存在20-30个腺苷酸组成的Poly（A）尾，关键在于帽子和尾巴上存在甲基化修饰，那些5rsquo;端上的修饰可以维持mRNA稳定性、mRNA前体剪切、多腺苷酸化、mRNA运输与翻译起始等，而3，poly（A）发生的修饰有助于出核转运、翻译起始以及与poly（A）结合蛋白一起维持mRNA的结构稳定。[3]

真核生物的基因表达调控包括了细胞质和细胞核中的调控，细胞核中DNA甲基化和染色质结构改变都可调控基因的转录，最初转录的初始转录本内包含内含子，在此后的加工中需要5rsquo;端加上帽子，切掉内含子，最终变成成熟的mRNA，在此过程中还会结合一系列的蛋白质最终输出到细胞质中，而在细胞质中不同mRNA降解速率不同，翻译出来多肽后还需要经历蛋白质的加工、折叠、激活、降解，任何一个环节的失调都有可能导致生理的失调从而导致疾病。[4]

1.2 可变剪接的意义

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