开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 本课题研究目的、背景及意义
1.研究目的
从青海湖周边采集土样, 用几丁质选择培养基法共分离出产几丁质酶菌株。对菌种的基本性质的进行鉴定。
2.研究背景
几丁质又称为甲壳素, 它是由N-乙酰-D-氨基葡萄糖以beta;-1 , 4-糖苷键连接而成的长链多聚物 , 也是自然界中第二丰富的多聚糖 。每年自然界中产生的几丁质数量极其巨大, 几丁质及其降解产物作为重要的有机碳源和氮源参与生态系统的物质交换和能量流动 。几丁质酶能催化分解几丁质, 产生几丁寡糖和几丁二糖。几丁质酶的水解产物低聚糖有抗菌作用, 可以调节生物体的免疫力, 还可以抑制肿瘤细胞的生长等。几丁质酶对植物真菌病害的防治也有作用。因此, 几丁质酶在食品、医药、农业以及化妆品等行业具有独特的使用价值 .目前, 在植物、动物和微生物中都发现了几丁质酶.绝大多数高等植物中都可以产生几丁质酶, 几丁质酶主要分布于植物根、茎、叶和愈伤组织中, 在感染了真菌的时候, 这些部位几丁质酶的含量明显增高, 从而避免植物遭受某些真菌或害虫的侵害 。一些细菌和真菌能够利用几质,说明在这些细菌和真菌中存在几丁质酶 。近年来,微生物几丁质酶的研究受到人们的重视。Cott rell 认为至少10 %的海洋可培养细菌能水解几丁质, Wang 等认为有25 %~ 50 %的土壤链霉菌能产几丁质酶。现已从多种微生物中分离出了几丁质酶, 对微生物几丁质酶的分布、定位、结构、性质、基因克隆、诱导表达以及调控机制等多方面的研究均取得了一定进展现在的环境污染问题是全球关注的焦点问题, 将产几丁质酶微生物应用于治理环境污染方面的研究进来有所进展。随着几丁质酶基础理论和应用研究日益受到重视, 几丁质酶研究已成为几丁质科学中的一个重要分支, 其应用前景十分广阔, 可应用于医药、化工、功能食品、纺织、印染、造纸及环境保护等诸多工业部门和领域。
3.研究意义
几丁质酶广泛存在于植物、动物和微生物中。细菌的几丁质酶由于潜在的商业用途倍受人们关注几丁质酶在生物体自溶、形态发生和营养代谢中具有一系列重要作用,其底物及降解产物在生命科学、医学、化工、农业及环境科学等方面潜在的应用价值。近年来, 几丁质
酶菌株在海洋废料处理、保护和农业等方面有着广泛的应用前景。
二、研究内容及方法
1.产几丁质酶微生物的筛选 用挑针刮取发酵种子培养基平板上的菌落(不刮下培养基), 分别接种到盛有发酵用培养液的250mL 三角瓶中。在摇床上168r/min 、26 ℃ 振荡培养96h , 10000r/min 离心20min , 保留上清液。
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