具有遍在染色质开放表达元件（UCOE）载体的构建及应用文献综述

 2022-12-12 19:04:24

开题报告内容：

具有遍在染色质开放表达元件（UCOE）载体的构建及应用

[研究的主要目的和意义]

传统的质粒载体整合进哺乳动物染色体基因组后，通常需要筛选大量的克隆才能得到一个稳定、高表达的单克隆细胞株。许多整合事件发生基因沉默，导致表达水平差异较大。主要原因可能与蛋白翻译后修饰有关，如DNA甲基化，组蛋白去乙酰化，染色质凝聚等影响蛋白表达。研究发现，有些调控元件与组织特异性和整合位点无关，能够使异染色质处于开放状态使基因始终保持转录状态而不沉默。先前有报道说取自人类HNRPA2B1和TBP-PSNB1位点的包含CpG岛的大型片段对外源基因的异染色质介导的基因沉默有阻断性。本课题拟通过在表达载体启动子上游引入非甲基化的CpG岛片段－遍在染色质开放表达元件（UCOE），以提高转染后的目的蛋白表达表达量。该方法也可以应用到其他细胞或蛋白的表达，为研究特定蛋白功能提供一个很好的平台。

[拟研究或解决的问题]

本课题拟通过在表达载体启动子上游引入非甲基化的CpG岛片段—遍在染色质开放表达元件（UCOE），以提高转染后的目的蛋白表达表达量。

[采用的研究手段及文献综述]

1 仪器与试剂

仪器：

Series II Water Jacketed CO2 孵箱（Thermo Forma）

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