开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
一、拟研究问题
次生代谢产物靶向HMGB1的研究;化合物抗骨肉瘤性质以及检测细胞增殖的方法;从蜈蚣肠道中曲霉真菌次生代谢产物中筛选出一个靶向HMGB1的抗骨肉瘤增殖作用的活性的化合物
二、研究手段
细胞培养、传代、冻存和复苏;MTT法检测细胞增殖;细胞划痕的方法筛选出抑制骨肉瘤细胞的侵袭的化合物;细胞次生代谢产物的提取;Western blot方法检测化合物作用后对HMGB1表达的影响
三、文献综述
1、蜈蚣肠道菌的抑菌活性和酶活性
蜈蚣是一种有毒的节肢动物,其药用价值很高。它的肠道微生物有什么功效,相关报道极少,用3种培养基分离培养了其肠道微生物,共获得10株菌,其中有9种细菌,1种放线菌,最后对10株菌进行4种酶活性检测和6种致病菌抑菌活性检测。酶活性检测结果显示,W10具有纤维素酶活,W12具有蛋白酶活,W1,W4,W6,W10,W15和W22具有脂肪酶活性,对微生物酶活性的研究可了解蜈蚣肠道内微生物的消化功能;而对微生物抑菌活性的研究可对蜈蚣毒素的分泌提供一些参考,同时为新药物的研究提供菌种来源[1]。
- 细胞划痕方法
细胞划痕(woundensp;healing)法是简捷测定细胞迁移运动和修复能力的方法,类似体外伤口愈合模型,在体外培养皿或平板培养的单层贴壁细胞上,用微量枪头或其它硬物在细胞生长的中央区域划线,去除中央部分的细胞,然后继续培养细胞至实验设定的时间,取出细胞培养板,观察周边细胞的生长迁移能力,实验通常需设定正常对照组和实验组,实验组是加了某种处理因素或药物、外源性基因等的组别,通过不同分组之间的细胞对于划痕区修复能力的不同,可以判断各组细胞的迁移与修复能力。
3、高迁移率族蛋白 1(high mobility group box 1,HMGB1)的有关性质
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