开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
本课题拟研究的问题:
葛根汤主要用于治疗太阳病和刚痉,有研究发现,葛根汤具有防治寒湿凝滞型原发性痛经的新用途,符合中医理论的“异病同治”。葛根汤治疗原发性痛经具有单次给药有效、连续给药不易复发的特点。但中药复方化学成分复杂,葛根汤防治原发性痛经的药效物质基础和作用机制尚未阐明。目前有发现葛根汤可能可通过参与调节TRPM8的表达来治疗原发性痛经。本课题拟在前期研究的基础上,进一步探讨葛根汤是否通过参与调节TRPM8的表达发挥治疗原发性痛经的作用。
本课题拟采用的研究手段:
分别从整体动物、离体子宫和子宫平滑肌细胞三个水平进行验证。
实验方案设计:
实验动物:TRPM8-/-和野生型雌性未孕小鼠(C57BL/6),体重18~22g。小鼠分笼饲养,自由饮水和进食,饲养室温度23~25℃,相对湿度为40%~80%。适应性饲养2~3天后开始实验。
实验药品和试剂:兽用苯甲酸雌二醇,缩宫素注射液,TRPM8抑制剂,TTRPM8激动剂
实验方法:
1 制备葛根汤水提液:将葛根汤的各组成中药饮片,按照葛根:麻黄:桂枝:芍药:甘草:生姜:红枣=4:1:3:3:2:2:4比例混合,共95g,以10倍量水浸泡30min后,热回流提取1h,滤渣再加8倍水提取40min,合并两次滤液并浓缩至一定量作为供试品。
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