地龙活性蛋白筛选及其活性机制初步探讨文献综述

 2022-12-25 12:12:32

开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）

【拟研究的问题】

动物药地龙药用历史悠久，资源丰富。现代研究表明蛋白多肽类为地龙主要成分，具有抗凝血、抗脑卒中、抗炎、抗菌、抗纤维化等多方面的药理作用。本课题拟通过细胞实验对合成的地龙多肽进行抗炎及抗脑卒中活性评价，以期筛选得到地龙活性多肽。并基于活性多肽，结合氢核磁共振（1H NMR）代谢组学，对活性多肽的作用机制进行初步探讨。

【采用的研究手段】

本课题拟建立基于人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）的糖氧剥夺（OGD）离体脑缺血模型，以氧糖剥夺后快速恢复氧糖供应的方式来模拟人体脑缺血再灌注损伤，从而进行地龙多肽的抗脑卒中活性的评价。实验中，使用细胞存活率（MTT）、乳酸脱氢酶（LDH）和超氧化物歧化酶（SOD）的活力以及丙二醇（MDA）的释放量，来评价地龙多肽的神经保护作用。

在探究地龙多肽抗炎活性方面，本实验拟采用脂多糖（LPS）诱导的巨噬细胞（RAW 264.7）细胞模型。通过检测各部位对细胞释放一氧化碳（NO）、肿瘤坏死因子alpha;（TNF-alpha;）和激活核转录因子-kappa;B（NF-kappa;B）的抑制率来评价地龙多肽类成分的抗炎活性。

本课题拟采用1H NMR代谢组学的方法对地龙多肽抗脑卒中和抗炎活性机制进行初步探究。

【文献综述】

1. 地龙蛋白抗脑卒中活性研究

脑卒中又称“中风”、“脑血管意外”（Cerebralvascular accident, CVA），是一种急性脑血管疾病，是指脑部血管突然破裂或因血管阻塞，导致血液不能流入大脑，从而引起颅内血液循环障碍，脑组织受损的一种疾病[1]。脑卒中具有发病率高、致残率高、病死率高，复发率高的特点[2]，医学界将其与冠心病、癌症并列为威胁人类健康的三大疾病。根据发病的原因，脑卒中可分为缺血性脑卒中（脑梗塞、脑血栓形成）和出血性脑卒中两种主要的类型。其中，缺血型脑血管病是脑卒中的主要发病形式，约占全部卒中的85%[3]，缺血性脑卒中又称为脑梗死，是脑部血管堵塞后，导致缺少能力供给而引起局部神经细胞坏死的病理过程。根据缺血性脑卒中的特点，临床上主要有两种治疗方案：一是通过溶栓、扩张血管、调节血液状态等以改善脑缺血区域供血[4]；二是通过阻断神经细胞死亡，减轻神经细胞损伤，保护神经细胞结构和功能，促进受损伤神经细胞恢复等方式达到神经保护的目的[5]。

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