开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究目的与意义
血管生成在肿瘤生成中发挥着重要的作用，因此阻止血管发生成为治疗肿瘤的重要对策。血管生成是一个复杂的动态的过程，有大量调节血管生成的细胞因子参与这一过程，如血管内皮生长因子（VEGF）、表皮细胞生成因子（EGF）、血小板源性生长因子（PDGF）、碱性成纤维因子（bFGF）等；其中VEGF作为血管生成最重要的调节因子之一，几乎影响了血管发生的所有过程。研究表明，VEGF在肿瘤的发生发展中并不仅仅局限于通过促进血管生成以及提高血管通透性发挥作用，还可以影响存在于肿瘤微环境中免疫细胞的功能，继而影响机体对肿瘤的反应。
目前临床上已有多种抗VEGF单抗用于肿瘤治疗，如贝伐单抗，雷莫芦单抗。但完整的抗体具有Fc段结构，在体内可能会引起免疫毒性反应，而且人源的IgG在制备过程中需要对Fc段进行适当的修饰，如糖基化，对表达系统和培养条件要求较高，成本较高。为了解决以上问题，本课题将尝试制备抗VEGF单抗的Fab片段。Fab抗体分子结构比较稳定，不仅保持了天然抗体分子Fv段的结构，还具有穿透性强、分子量小、免疫原性低等优点，而分子量小使Fab抗体易于进入肿瘤组织更深处，并且由于Fab抗体不具有Fc段，不需要糖基化，所以可用大肠杆菌表达系统制备，以降低生产成本。本课题通过构建抗VEGF抗体Fab片段的原核共表达质粒，并将其转入Rosatte(DE3)菌株中，经IPTG诱导后大量表达。
二、拟研究或解决的问题
（1）抗VEGF的Fab抗体共表达质粒的构建
（2）抗体的诱导表达及诱导过程中各条件的优化
（3）抗体表达情况的测定
三、研究方法和手段
1、抗VEGF的Fab抗体共表达质粒的构建
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