一、拟研究或解决的问题
探索构建新型抗结核病原样抗原(PLA)疫苗,并研究其免疫机理与应用特点。
在本研究中,将选择实验室已经建立好的PLA载体乙肝病毒核心抗原病毒样颗粒(HBcAg-VLP)和E.coli噬菌体的Q-beta VLP。通过构建表达载体等基因工程手段将结核抗原ESAT6的抗原表位表达在VLP载体表面。之后将检查这种PLA抗原是否能够高效表达,并分离纯化能组装的PLA。如果能按期获得ESAT6-PLA,还将尝试动物免疫,检测该PLA在体内刺激Th1 细胞反应的效果。
二、研究手段:
1、构建表达载体等基因工程手段将结核抗原ESAT-6的抗原表位表达在HBcAg-VLP载体表面。
2、将重组的PLA通过基因工程手段表达在大肠杆菌系统中。
3、通过密度梯度离心对PLA进行纯化,并检测其是否高效表达。
4、将PLA进行小鼠免疫试验。
5、利用免疫斑点试验检测特异性IFN-gamma;的水平。
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