缺氧诱导因子HIF-1α多肽的多重反应监测质谱定量方法的建立文献综述

 2023-03-02 23:05:43

多重反应监测技术靶向定量蛋白质的研究进展摘要:多重反应监测技术(MRM)是一种串联技术,采用三重四级杆质谱仪进行质谱分析。

它是靶向定量应用的黄金标准,是一种能够在复杂样品中对特定分子质量进行定量检测的质谱分析技术,特别是一些细胞内痕量存在的不稳定蛋白质或者蛋白质翻译后修饰产物,质谱的检测限也要明显低于常规的免疫印迹法。

目前MRM技术常用于药物代谢产物、激素和农药杀虫剂等有机小分子以及蛋白质、核酸、糖类等生物大分子领域的研究。

本文主要介绍了多重反应监测技术的原理以及在蛋白质定量上的研究进展。

质谱是样品分子或原子在外部能量的作用下电离或电离后进一步分解而生成碎片离子,这些离子在质量分析器中(通常是电场或磁场)作用下按照带电粒子的质量对所带电荷之比值的不同而分离排列的从而进行分离鉴定定量分析的谱学方法,可进行各种有机物、无机物的定性或定量分析。

质谱是强有力的质量分析工具,能为结构定性提供较多的信息,不仅特异性强,而且具有极高的检测灵敏度。

质量分析器是质谱仪的核心组成部分之一,现阶段多采用多级质谱串联方式来进行蛋白质的质谱定量工作,以弥补质量分析器单独使用时的不足。

例如,三重四级杆质谱仪就是其重要运用之一。

在四级杆质量分析器中,四根电级杆分为两两一组,分别在其上施加射频反向交变电压,位于此电势场中的离子,被选择的部分稳定后可到达检测器,或者进入之后的空间进行后续分析。

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