探讨和比较制备和分馏山竹果皮中的低聚物原花青素的两种方法：凝胶过滤层析法和逐步溶剂沉淀法
摘要：在生物医学领域中，低聚物原花青素即（OPCs）的制备和分馏对于单宁的应用尤其重要。采用葡萄糖凝胶LH-20凝胶过滤层析法和逐步溶剂沉淀法两种不同的方法，从山竹果皮中制备和分离OPCs。通过反相高效液相色谱法、正相高效液相色谱法、电喷离质谱法以及凝胶渗透色谱法对馏分进行比较。GFC直接提纯的低聚物（单体对五聚物）多分散性值接近于1，且生成的馏分带有很高的总酚含量（每克没食子酸当量含有800.59克）但产率较低(7.72%)。逐步溶剂沉淀法快速制备和分馏的OPCs的总酚量较低（每克没食子酸当量含有609.57克）但产量较高（24.74%），多分散性值也较高。加上，我们发现在不同的具有丰富单宁的馏分中有明显的结构和数量差异，并且由GFC制得的馏分能更好地反映从山竹果皮中获得的OPCs的结构多样性和复杂性。这篇文章叙述了在生物医学领域中制备和分馏OPCs的不提同方法。
关键词：山竹果皮、低聚物原花青素、制备、分馏、凝胶过滤层析法、逐步溶剂沉淀法
引言：作为有名的浓缩单宁（CTs）的原花青素因其在生物医学的活性[1–4]。逐渐引起人的关注。它们由一组聚羟基黄烷-3-醇低聚物(单体到五聚物)和相应的聚合物[5]组成，可以形成不同分子量的原花青素的高度复杂混合物(图1）[6]。低聚物原花青素通常显示出比聚合物更高的生物活性。此外，其生物活性（例如：抗氧化性、酶抑制作用和抗癌性）与分子量大小（或者聚合度，DP）和总酚含量[7-9]有关。因此OPCs的制备及分馏对其生物应用有着重要应用。
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邮件：书广 hanshg@njfu.edu.cn
1中国江苏210037南京林业大学材料科学与工程学院
通常，制备OPCs的方法有两种。第一种是固相液相色谱，例如反相液相色谱法[10]，正相液相色谱法[11]，亲水色谱[12]和凝胶过滤层析法(GFC)[13-15]。然而，固相液相色谱在制备却有着回收率低、产量低等缺点。为了克服这些缺点，液相色谱分离技术，（例如：离心分区色谱法[16]，高速逆流色谱分离技术[17]，逐步溶剂沉淀法(PSP)[18]）最近得到了发展。液-液色谱法是一种快速分离方法，它依赖于OPCs在不同溶剂中的的配分系数，且需要结合固相液相色谱对目标物质进行检测。上述方法均可分馏提纯不同DP值的OPCs。然而，GFCs主要应用于OPCs[13,15]的初步提纯和分馏，PSP在应用于制备OPCs时很少被提及。此外，GFC和PSP都不需要特殊的设备并且允许快速操作，几乎无限扩大。虽然研究的初学者可以使用，但关于这两种方法在制备OPCs的分步制备方面与其他方法的区别，几乎没有全面的指导。因此，探索这两种方法的制备和分馏尤其重要。此外，比较这两种方法也会有利于学习了解固相液相色谱和液液色谱。
山竹果皮是制备OPC的良好来源[19]。在这个实验中，作为OPCs来源的山竹果皮被用来研究GFC和PSP两种方法的制备和分馏能力。
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